روش ترنسفکشن با کیت کلسیم فسفات وابسته به مخلوط کردن DNA با محلولی از کلرید کلسیم است که با افزودن یک محلول بافری سالین/ فسفات (saline/phosphate)، در دمای اتاق انکوبه شده تا رسوبات DNA با کلسیم تشکیل شود. سپس محلول حاوی این رسوبات به کشت سلولی اضافه شده و توسط پدیده آندوسیتوز وارد سلول ها شده و از طریق اندوزومها به هسته سلول منتقل میشوند. علیرغم حساسیت روش کلسیم فسفات به pH، دما و تغییر غلظت نمکها، این روش در ترنسفکشن انواع مختلفی از سلولهای جانوری استفاده میشود.
تصویر زیر : نتیجه ترنسفکت سلول HEK 253T با کیت ترنسفکشن کلسیم فسفات
در این کیت با استفاده از بافرهای کلسیم فسفات، می توان پلاسمیدهای نوترکیب را به طور مستقیم به سلول های هدف انتقال داد و یا با کمک وکتورهای کمکی لنتی ویروسی از جمله psPAX2 و pMD2.G ذرات ویروسی بسته بندی شده برای ترنسداکت سلول هدف تولید نمود.
valumne | Calcium Phosphate Transfection kit | کد |
---|---|---|
6ml | HBSS buffer | BN-0011.19 |
6ml | Water buffer | BN-0011.19 |
800λ | TE | BN-0011.19 |
800λ | CaCl2 | BN-0011.19 |
300λ | Polybrene (2 mg/ml) | BN-0011.19 |
* قیمت کیت ترنسفکشن کلسیم فسفات ، 9،000،000 ریال است.
* این کیت برای ترنسفکت 15 فلاسک T25 و یا ترنسفکت 5 فلاسک T75 کاربرد دارد.