تمایز‌استئوژنيک (Differentiation Osteogenic) تمایز سلول بنیادی مزانشیمی در‌شرایط برون تني، معمولا با پدیدار شدن سلول هاي استئوبلاستي، افزایش فعاليت آلكالين‌فسفاتازي، تشكيل دانه هاي معدني‌شبيه به استخوان که محتوي کلاژن تيپ یک است شناسایي مي شود. در طول تمایز استئوببلاست ها بيان 83 پروتئين حداقل به مقدار دو برابر افزایش یافته و مقدار 21 پروتئين دیگر کاهش پيدا مي کند. این‌تمایز در‌شرایط آزمایشگاه نيازمند فاکتورهایي مثل دگزامتازون، اسيد آسكوربيکو بتاگليسروفسفات است
تمایز سلول بنیادی مزانشیمی از آن دسته سلولهايي هستند كه در بازسازي بافت استخوان صدمه ديده نقش مهمي را بازي ميكنند. از آن جایی که یکی از نشانههای تشکیل بافت استخوانی، ایجاد رسوب های کلسیمی میباشد.
یکی از معیارهای مزانشیمی بودن سلولهای بنیادی استخراجی، قابلیت تمایز آنها به بافت استخوانی است بنابراین سلولها طی یک بازه زمانی تحت تیمار با محیط تمایزی استخوانی قرار میگیرند که شامل محیط DMEM حاوی FBS و فاکتور های اصلی تمایز به استخوان می باشد. این فاکتور ها عبارتند از:
Dexamethasone
β- Glycerol Phosphate
Ascorbic Acid
تمایز سلول بنیادی مزانشیمی به استئوبلاست با استفاده از میزان رسوب کلسیم در قالب تست بیوشیمیایی و با استفاده از کیت مخصوص امکان پذیر است. کلسـیم بـا کرزول فتالئین ایجاد کمپلکسی مینمایـد کـه در محـیط قلیایی، ارغوانی رنگ است و شدت رنگ حاصله متناسب با غلظت کلسیم میباشد که در طول موج 570 نانومتر قابل اندازه گیری میباشد.