سلولهاي بنيادي مزانشيمي از آن دسته سلولهايي هستند كه در بازسازي بافت استخوان صدمه ديده نقش مهمي را بازي ميكنند. استخوان منبع اصلی کلسیم و سلولهای پیش ساز در بدن است. در ميـان آزمـونهـاي بيولوژيكي مختلف براي تخمين ميزان فعاليت استئوبلاستها ، سنجش میزان آلكالين فسفاتاز (ALP) آزموني مهم است. آلكالين فسفاتاز، آنزیمی است که به صورت طبیعی در سراسر بدن وجود دارد و در لایه خارجی غشا سلولی وجود دارد و در حقیقت يك اكتوآنزيم است كه به وسيله سلولهـاي استئوبلاست توليد ميشود که واکنش هیدرولیز فسفاتهای آلی را در pH قلیایی انجام میدهد. بنابراین سطوح این آنزیم در زمان فعالیت استخوانی آفزایش می یابد و به عنوان یک نشانگر تمایز استخوانی محسوب می شود. علاوه بر این وجود آلکالین فسفاتاز برای معدنی شدن استخوان ضروری می باشد و هرچه فعالیت آن بیشتر باشد تاثیر مهمی بر تشکیل استخوان خواهد داشت. در طول تشکیل استخوان با هیدرولیز فسفات و پیروفسفات ها توسط آلکالین فسفاتاز اثر بازدارنده آنها بر استخوان سازی از بین رفته و روند استخوانی شدن تسریع می شود. یکی از معیارهای مزانشیمی بودن سلولهای بنیادی استخراجی، قابلیت تمایز آنها به بافت استخوانی است بنابراین سلولها طی یک بازه زمانی تحت تیمار با محیط تمایزی استخوانی قرار میگیرند که شامل محیط DMEM حاوی FBS و فاکتور های اصلی تمایز به استخوان می باشد. این فاکتور ها عبارتند از:
Dexamethasone
β- Glycerol Phosphate
Ascorbic Acid
سلولهای مزانشیمی پس از تیمار با محیط تمایزی استخوان جهت تست الکالین فسفاتاز آماده می شوند و پس از طی شدن روند انجام تست توسط کیت مخصوص، بوسیله دستگاه مقدار آلکالین فسفاتاز به صورت کمی خوانده می شود.